Վորտեքսինգ չի կտրի ձեր ՌՆԹ-ն՝ այն անօգտագործելի դարձնելու համար, եթե դուք կատարում եք պատահական պրիմինգ RT, միայն եթե ցանկանում եք կլոնավորել երկար mRNA: Invitrogen-ի տեխնիկական աջակցությունը նույնպես ճիշտ է: Քլորոֆորմն ավելի ծանր է, քան Տրիզոլը և կսուզվի խողովակի հատակին:
Արդյո՞ք անվտանգ է պտտեցնել ՌՆԹ-ն:
Մի՛ պտտեք տրիզոլի լիզատները կամ ՌՆԹ նմուշները՝ կտրվածքից խուսափելու համար: Արդյունահանումից հետո ՌՆԹ-ի նմուշները մշտապես պահել սառույցի վրա: Այս արձանագրությունը նախատեսված է 1 մլ տրիզոլ 1,5 կամ 2 մլ խողովակի մեջ լուծված նմուշների համար։
Կարո՞ղ եք տաքացնել ՌՆԹ:
Հետևաբար, խուսափեք բարձր ջերմաստիճաններից ( +65°C-ից բարձր), քանի որ դրանք ազդում են ՌՆԹ-ի ամբողջականության վրա: Փոխարենը, երկրորդական կառուցվածքները հալեցնելու համար, 15 րոպե տաքացրեք ՌՆԹ-ն մինչև +65°C՝ դենատուրացնող բուֆերների առկայության դեպքում:
Ինչպե՞ս եք կրկին կասեցնում ՌՆԹ-ի կարկուտները:
վերագործարկեք ձեր գնդիկը տաք ջրով (40-50°C): 10 րոպե ինկուբացնել 45 °C ջերմաստիճանում: դրեք դրանք +4-ում 4-6 ժամով։
Ինչպե՞ս եք նստեցնում ՌՆԹ-ն:
A.
Աղի կոնցենտրացիան կարգավորելուց հետո ՌՆԹ-ն կարող է նստել ավելացնելով 2,5 ծավալ էթանոլ կամ 1 ծավալ իզոպրոպանոլ և մանրակրկիտ խառնել, որին հաջորդում է սառեցնել առնվազն 15 րոպե -20°C-ում։
