Եթե ձեր սպիտակուցը նույն չափի չէ, ինչ ձեր հակամարմինը, կարող եք էլյուտ անել 0.1M գլիցինով, pH2-3 և այնուհետև առանձնացնել հետաքրքրող սպիտակուցը հակամարմինից SEC-ի միջոցով: (ինչպես superdex 200).
Ի՞նչ է սպիտակուցը մաքրելը:
Սպիտակուցները զտվում են օրգանական լուծիչի աճող քանակիգրադիենտով, ինչպիսին է ացետոնիտրիլը: Սպիտակուցները զտվում են ըստ իրենց հիդրոֆոբության: HPLC-ով մաքրվելուց հետո սպիտակուցը գտնվում է լուծույթում, որը պարունակում է միայն ցնդող միացություններ և կարող է հեշտությամբ լիոֆիլացվել:
Ինչու՞ են սպիտակուցներն ունեն ցածր pH լուծույթ:
Ցածր pH բուֆերի օգտագործումը A սպիտակուցից զտման համար հայտնի է, որ նպաստում է արտադրանքի ագրեգացմանը Այնուամենայնիվ, ավելի սահմանափակ ապացույցների շարքը ցույց է տալիս, որ ցածր pH-ը չի կարող միակը լինել: A սպիտակուցի քրոմատագրման մեջ ագրեգացման պատճառները, ավելի շուտ, գործընթացի այլ կողմերը կարող են զգալիորեն նպաստել:
Ինչպե՞ս է կատարվում էլյուցիան:
Անալիտիկ և օրգանական քիմիայում էլյուցիան մեկ նյութը մյուսից արդյունահանելու գործընթացն է՝ լուծիչով լվանալու միջոցով; ինչպես լիցքավորված իոնափոխանակման խեժերի լվացման դեպքում՝ գրավված իոնները հեռացնելու համար: … Այն բանից հետո, երբ լուծիչի մոլեկուլները տեղաշարժեն անալիտը, անալիտը կարող է հանվել սյունակից՝ վերլուծության համար:
Քանի՞ հակամարմին է անհրաժեշտ Coip-ի համար:
Սովորական Co-IP փորձերի համար իմ օգտագործած հակամարմինը է ոչ ավելի, քան 2 մգ (Իմ հավաքածուում 1,4 -2,0 մգ հակամարմինը բավարար է 2500-5000 մգ գրավելու համար: սպիտակուցի լիզատ:) Բայց դա դեռ կախված է ձեր նմուշներում ձեր թիրախային սպիտակուցների արտահայտման մակարդակից, այնպես որ դուք հավանաբար պետք է որոշ փոփոխություններ կատարեք:
